ADN recombinante

ADN Recombinante en la Naturaleza

Los plásmidos son secuencias de ADN extracromosómicas que tienen la capacidad de reproducirse autónomamente y, algunos, de pasar de una célula a otra y convertirse en parte integrante del cromosoma que los acoge. El plásmido pBR 322 es el más ampliamente usado para clonar, es de pequeñas dimensiones y lleva los genes para la resistencia a los antibióticos ampicilina y tetraciclina.

ADN Recombinante Artificial

La estreptoquinasa actúa como agente fibrinolítico, capaz de convertir el plasminógeno humano presente en la sangre en plasmina, una enzima proteolítica que degrada la fibrina que forman los coágulos en productos de degradación solubles

Referencias:http://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Recombinant-DNA-(Spanish).aspx

http://scielo.sld.cu/pdf/rtq/v35n2/rtq04215.pdf

Prueba diferente a PCR en Cardiopatia Isquémica

Técnica molecular Microarrays utilizada en cardiopatia isquemica

Los resultados mostraron que un grupo de polimorfismos localizados en 9 genes aumentan el riesgo de infarto de miocardio.En concreto cada uno de ellos supone un riesgo entre un 10% y un 15 % mayor de sufrir un infarto agudo de miocardio. Dos de estos genes intervienen en el control del colesterolen sangre los denominados LDLR y PCSK9 y un tercero participa en los mecanismos de inflamacion que influyen en el desarrollo de placas de arteriosclerosisen las arterias el denomindado CXCL12.

Tomado de: https://encrypted-tbn3.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcSpnCOEuZVI4zf8p4Z0ZwbNu-O9WaNouxqxBtWFEebi1HRA_vs-

Referencia:http://www.revespcardiol.org/es/revistas/revista-espa%C3%B1ola-cardiologia-25/estudio-componente-genetico-cardiopatia-isquemica-los-estudios-13137263-riesgo-cardiovascular-2009

Prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa en la Cardiopatía isquémica

T:  Polimorfismos génicos RRM1, RRM2 y ERCC2en la enfermedad de la arteria coronaria

O: Investigar los polimorfismos genéticos relacionados con la vía de la reparación por escisión de
nucleótidos en la aterosclerosis.

M: Sangre periférica 

A.N: ADN genómico

G: 
RRM1 (rs12806698)             44,321 pb
RRM2 (rs6859180)               10,722 pb
ERCC2                              21,082 pb

EXT: 
Los aislamientos de ADN se realizaron con Invitrogen iPrep Purification Instrument y Invitrogen iPrep PureLink gDNA Blood Kits

PCR: PCR en tiempo real
PASOS: 40 ciclos

D  95ºC     15s
H  -------
E   60ºC     60s

V: análisis en tiempo real interpretando los datos fluorescentes de las sondas de hibridación.

Sensibilidad y especificidad analítica: No tiene

Referencia: http://iv.iiarjournals.org/content/30/5/611.full

Prueba de tamizaje y confirmatoria de la cardiopatía isquémica

TAMIZAJE: 

Prueba de perfusión miocardica/Gammagrafía Cardíaca de Perfusión (gated-SPECT):

Valora de forma objetiva la función y perfusión miocárdica regional y de esa forma facilita el diagnóstico de la isquemia y necrosis miocárdica, mostrando la cantidad de tejido viable y permite a la vez estratificar el riesgo individual de cada paciente. 

Tomada de: http://www.ecografiacardiaca.com/imagen-multimodal/ganmagrafia-de-perfusion-miocardica/

CONFIRMATORIA: 

Electrocardiograma:

El ECG es fundamental para el diagnóstico de la cardiopatía isquémica, nos permite localizar la zona del corazón afectada por el proceso isquémico, según las derivaciones en que aparezcan las alteraciones. Siempre debe interpretarse el ECG en conjunto con la totalidad del cuadro clínico, del examen físico, de otros hallazgos de laboratorio.

Tomado de: https://mx.depositphotos.com/70129529/stock-illustration-electrocardiogram-ecg-ekg-of-ischemic.html

Referencias:

http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1817-74332015000100005

https://medicina.uc.cl/publicacion/ecg-diagnostico-la-cardiopatia-coronaria/

Alteración de la epigenómica en la cardiopatía isquémica

Los microARN (miARN) son una clase de ARN no codificante de pequeño tamaño (20-25 nucleótidos) que participan en la regulación génica. Varios estudios han analizado la asociación de los miARN circulantes con la enfermedad coronaria. En un trabajo pionero, Fichtlscherer et al. propusieron los valores circulantes de miR-126, miR-17, miR-92a, miR-133a, miR-145, miR-155 y miR-208a como indicadores de la presencia de enfermedad coronaria. El perfil de miARN circulantes parece estar asociado no solamente con la presencia de lesión coronaria, sino también con la gravedad de la enfermedad.

MicroRNA circulantes asociados con síndromes coronarios agudos y enfermedad arterial coronaria. Los micro ARN con un borde doble se han relacionado con el rasgo asociado en más de un estudioTomado de: https://heart.bmj.com/content/early/2015/04/09/heartjnl-2013-305402

Referencia: http://www.revespcardiol.org/es/biomarcadores-epigeneticos-enfermedad-cardiovascular-los/articulo/90461344/

 

Alteraciones de la traducción en la Cardiopatía Isquémica

Se encontró un haplotipo en el gen ALOX5AP que conlleva un exceso de riesgo de infarto de miocardio e ictus. Este gen codifica una proteína activadora de la lipooxigenasa 5, que interviene en la producción de leucotrienos, y que en modelos animales se ha relacionado con la arteriosclerosis. Los leucotrienos son metabolitos del ácido araquidónico y actúan como mediadores inflamatorios en la aterosclerosis, se sintetizan principalmente por eosinófilos, neutrófilos, mastocitos, basófilos, células dendríticas, macrófagos y monocitos. Actualmente, se ha convertido en una nueva diana terapéutica en la vía inflamatoria de la arteriosclerosis.

Metabolismo del ácido araquidónico.
Fuente: https://www.researchgate.net/publication/5485265_Influence_of_leukotriene_gene_polymorphisms_on_chronic_rhinosinusitis/figures

Referencias: 

https://patentados.com/2013/inhibidores-de-proteina-activadora-de-5

http://omim.org/entry/608557

http://www.revespcardiol.org/es/estudio-del-componente-genetico-cardiopatia/articulo/13137263/

Alteraciones de la transcripción en la Cardiopatía Isquémica

El factor de transcripción de la cadena κ de anticuerpos de células B (NF-κB), parece jugar un papel clave en diversas patologías cardíacas. En corazones humanos con aterosclerosis, se ha visto al NF-κB activo, está presente en las áreas fibrosas y ateromatosas de lesiones ateroscleróticas. La producción de múltiples citocinas y moléculas de adhesión, que en parte son controladas por la activación del NF-κB son importantes en la formación temprana de lesiones por la aterosclerosis. La activación desregulada de NF-kB contribuye a los procesos patógenos de diversas enfermedades inflamatorias.

NF-κB genes objetivo implicados en el desarrollo de la inflamación y la progresión
Tomado de: https://www.nature.com/articles/sigtrans201723/figures/1

Referencia: http://www.scielo.org.mx/pdf/acm/v75n3/v75n3a15.pdf 

https://www.nature.com/articles/sigtrans201723